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冷凍干燥保藏法

2019-03-20
?  冷凍干燥保藏法是將菌液在凍結(jié)狀態(tài)下升華其中水
  分,最后獲得干燥的菌體樣品。它同時具備干燥、低溫和缺氧的菌種保藏條件。所以,可使微生物菌種得到較長時間的保存,凍干的菌種密封在較小的安瓿中,避免了保藏期間的污染。也便于大量保藏。它是目前被廣泛推崇的菌種保藏方法。但是,該法操作相對繁瑣,技術(shù)要求較高。
  根據(jù)文獻記載,除不生孢子只產(chǎn)菌絲體的絲狀真菌不宜用此法外.其他多數(shù)微生物,如病毒、細菌、放線菌、酵母菌、絲狀真菌等都能凍干保藏。許多菌種用此法可保藏10年以上。
  真空冷凍干燥裝置有各種形式,報據(jù)需要的工作最可選用單管式、歧管式、鐘罩式、離心式、艙箱式等類型的真空干燥機。排列越是后面的類型,處理的量越大,設(shè)備也越復(fù)雜。
  凍干法保藏菌種的存活率受到多方面的形響,不同的生物承受凍于處理過程的能力不間,所以,有些菌種不適合用凍干法保藏。凍干前的培養(yǎng)條件和菌齡也是影響因素。適宜條件下培養(yǎng)至穩(wěn)定期的細胞和成熟的孢子具有較強的耐受凍干的能力。提倡采用較濃的菌懸液。雖然其存活率低,但絕對量比較高。保護擠對存活的影響很大,保護效果與保護劑化學(xué)結(jié)構(gòu)有密切關(guān)系。有效的保護劉應(yīng)對細飽和水有很強的親和力,脫脂牛奶作為保護劑對多種微生物均有滿意的結(jié)果,凍結(jié)速度慢會損壞細胞,而凍結(jié)速度過快(幾秒鐘內(nèi)完成凍結(jié))也會在細胞內(nèi)形成冰晶,損害細胞膜,影響存活。凍干管應(yīng)避光保藏,尤其是避免直射光。適宜的恢復(fù)培養(yǎng)條件可以提高存活率。
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